不同濃度巴西蘇木素對(duì)耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌生長(zhǎng)及抑制作用（一）
摘要：目的探討蘇木及其活性成分對(duì)耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌(CRABA)的殺菌作用及巴西蘇木素與美羅培南聯(lián)合抑菌作用。方法收集2020年該院檢驗(yàn)科微生物室分離的10株CRABA,采用微量肉湯稀釋法測(cè)定蘇木萃取液和巴西蘇木素的最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC),采用高效液相色譜技術(shù)測(cè)定蘇木萃取液的主要抑菌組分,采用繪制生長(zhǎng)曲線方法觀察巴西蘇木素對(duì)CRABA生長(zhǎng)的抑制作用,采用十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定巴西蘇木素對(duì)CRABA分泌蛋白的影響,棋盤法觀察巴西蘇木素與美羅培南聯(lián)合應(yīng)用的抑菌效果。結(jié)果蘇木萃取液對(duì)10株CRABA的MIC、MBC均為15.63 mg/mL,巴西蘇木素的MIC、MBC均為0.5000 mg/mL;高效液相色譜法和MIC測(cè)定得到巴西蘇木素為蘇木萃取液中主要抑菌組分。巴西蘇木素與美羅培南聯(lián)用時(shí),巴西蘇木素的MIC值由0.5000 mg/mL降至0.1250 mg/mL,美羅培南的MIC值由0.128 mg/mL降至0.064 mg/mL,FIC指數(shù)為0.75。結(jié)論蘇木中有效抑菌組分為巴西蘇木素,其機(jī)制可能是通過(guò)影響細(xì)菌蛋白的分泌發(fā)揮殺菌作用。
鮑曼不動(dòng)桿菌是一種需氧非發(fā)酵的革蘭陰性桿菌，廣泛存在于自然界及人體皮膚，為臨床常見(jiàn)的條件致病菌。由于其生存能力強(qiáng)，并且存在多種耐藥機(jī)制，常常有多重耐藥的特性，而這種多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌已成為醫(yī)院感染的重要病原菌。碳青霉烯類抗菌藥物曾被認(rèn)為是抗菌活性最強(qiáng)的內(nèi)酰胺類抗菌藥物,但隨著此類藥物的廣泛使用，鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥性日益增強(qiáng)，故臨床對(duì)此類細(xì)菌面臨無(wú)藥可用的窘境。蘇木作為傳統(tǒng)天然中藥，具有廣泛的生物活性。有研究表明，蘇木中成分巴西蘇木素對(duì)各類微生物都有抑制作用，但對(duì)耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRABA)的抑菌作用國(guó)內(nèi)外鮮有報(bào)道，本研究通過(guò)體外試驗(yàn)探究巴西蘇木素對(duì)CRABA的抑制作用及其機(jī)制，并將巴西蘇木素與美羅培南進(jìn)行聯(lián)合藥敏試驗(yàn)觀察其抑菌作用，為中藥治療CRABA感染提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。
1資料與方法
1.1一般資料
1.1.1菌株來(lái)源
收集2020年本院檢驗(yàn)科微生物室分離的10株CRABA，其中5株來(lái)源于重癥監(jiān)護(hù)室，2株來(lái)源于急診科，3株來(lái)源于其他科室。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)任何一種碳青霉烯類藥物耐藥判定為CRABA株。質(zhì)控菌株為：美國(guó)模式培養(yǎng)物集存庫(kù)(American type culture collection，ATCC)25922大腸埃希菌(Escherichia coli，ECO)；ATCC 25923金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，SAU)。
1.1.2試劑與儀器
蘇木(康美藥業(yè)股份有限公司)；蘇木單體：巴西蘇木素，原蘇木素B(成都曼斯特生物科技有限公司)；美羅培南(北京索萊寶科技有限公司)；血平板(江門市凱林貿(mào)易有限公司)；肉湯培養(yǎng)基與MH瓊脂平板(廣州市迪景生物科技有限公司)；二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide，DMSO，天津市富宇精細(xì)化工有限公司)；DHP-9145A電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海一恒科學(xué)儀器有限公司)；全自動(dòng)微生物生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)儀(丹麥Biosense公司)；uLtiMate 3000型高效液相色譜儀(美國(guó)賽默飛世爾科技有限公司)；SPECTROstar Nano全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀(德國(guó)BMG公司)。
1.2方法
1.2.1藥物敏感試驗(yàn)
細(xì)菌分離培養(yǎng)鑒定及藥物敏感性試驗(yàn)所有標(biāo)本均按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第4版)》及本實(shí)驗(yàn)室的作業(yè)指導(dǎo)書要求進(jìn)行接種和培養(yǎng)，菌株分離純化后使用丹麥Biosense微生物生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)oCelloScope進(jìn)行菌種鑒定和常規(guī)藥物敏感性試驗(yàn)，按2020年美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(clinical and laboratory standards institute，CLSI)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行敏感性判斷。
不同濃度巴西蘇木素對(duì)耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌生長(zhǎng)及抑制作用（一）
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